1、实验过程保持膜的湿润,干的膜上的抗体难以被剥离干净;
2、抗体剥离效果跟膜的材质、抗体类型和溶度以及抗原结合能力等因素有关,所以在使用过程中需 要优化实验条件,方可达到比较好的结果。一般可以通过观察膜上抗体的量来优化剥离液孵育时间, 用ECL荧光工作液孵育再生后的膜约1分钟,然后显影,可确定膜上的抗体是否完全去除。如胶片上 显示条带,表明抗体未完全去除,应继续将膜浸泡在剥离液中再孵育5-10分钟,漂洗。然后再次ECL 检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间;
3、在使用中要规范穿戴实验服、手套进行操作。